核酸檢測具體流程如下：

1. 核酸提取

使用硅膠柱離心、磁性硅膠顆粒分離方法以及自動化儀器等商品化試劑或設(shè)備并按說明書操作。提取RNA時應注意防止RNA降解。DNA應置于-20℃保存，RNA和需長期保存的DNA應置于-80℃保存。

2. 逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA

逆轉(zhuǎn)錄cDNA合成反應需使用逆轉(zhuǎn)錄引物、dNTPs、逆轉(zhuǎn)錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無RNA/DNA酶的超純水以及RNA模板。在擴增儀或水浴箱中，在規(guī)定的溫度和時間下進行逆轉(zhuǎn)錄反應。建議使用商品化RT-PCR一步法試劑進行第一輪擴增反應。逆轉(zhuǎn)錄cDNA合成反應需使用逆轉(zhuǎn)錄引物、dNTPs、逆轉(zhuǎn)錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無RNA/DNA酶的超純水以及RNA模板。在擴增儀或水浴箱中，在規(guī)定的溫度和時間下進行逆轉(zhuǎn)錄反應。使用商品化RT-PCR一步法試劑進行第一輪擴增反應。

3. PCR擴增反應（使用二次擴增的套式PCR擴增方法）

PCR反應需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶（如Taq酶等）、緩沖液、和適量無RNA/DNA酶超純水、以及模板（DNA或cDNA）。在擴增儀中，按照設(shè)定的程序進行擴增。使用二次擴增的套式PCR擴增方法。

4. 擴增產(chǎn)物定性分析

擴增產(chǎn)物常用分析方法是瓊脂糖凝膠電泳法，與分子量標準比較，判斷擴增片段是否在預期的分子量范圍內(nèi)。其它擴增產(chǎn)物分析方法還有限制性內(nèi)切酶酶切分析、特異性探針雜交分析以及DNA序列分析等。自動化核酸擴增儀使用酶聯(lián)比色分析或熒光探針雜交等原理測定。

5.結(jié)果判定和完成報告單

（1）實驗成立的條件：每一次檢測需同時做兩個陽性對照、兩個陰性對照，只有陽性對照擴增出預期的片段、陰性對照沒有擴增出任何片段、雙份平行樣品結(jié)果一致的情況下實驗才成立，可以作出核酸陽性或陰性反應結(jié)果的判定。

（2）HIV核酸檢測陽性：發(fā)現(xiàn)核酸陽性反應，應該重復采集樣品進行復測，復測結(jié)果呈核酸陽性反應則判定為核酸陽性，復測結(jié)果為核酸陰性反應則判為不確定結(jié)果，需進一步隨訪檢測。

（3）HIV核酸檢測陰性：只可報告本次實驗結(jié)果陰性。

（4）應在完成檢測后5個工作日內(nèi)發(fā)出檢測報告。