緩沖液大量稀釋后pH變化在什么范圍內(nèi)
 

　　緩沖液大量稀釋后pH只是比原來的溶液有很少的變化。因?yàn)橄♂屩?，?huì)促進(jìn)緩沖溶液加速水解，其ph值會(huì)因此得到補(bǔ)償，而不會(huì)發(fā)生劇烈的變化。
 

　　由弱酸及其鹽、弱堿及其鹽組成的混合溶液，能在一定程度上抵消、減輕外加強(qiáng)酸或強(qiáng)堿對溶液酸堿度的影響，從而保持溶液的pH值相對穩(wěn)定。這種溶液稱為緩沖溶液。緩沖體系由：
 

　　1、弱酸和它的鹽(如HAc---NaAc)
 

　　2、弱堿和它的鹽(NH3·H2O---NH4Cl)
 

　　3、多元弱酸的酸式鹽及其對應(yīng)的次級(jí)鹽(如NaH2PO4---Na2HPO4)的水溶液組成。
 

　　常用緩沖液的緩沖范圍
 

　　當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時(shí)，有阻礙溶液pH變化的作用，稱為緩沖作用，這樣的溶液叫做緩沖液。
 

　　下圖展示了一些我們常用的一些緩沖液的緩沖范圍以及相應(yīng)的pKa值，供選擇不同PH值的緩沖液時(shí)作為參考。
 

　　這些常用的緩沖液包括：MES、ADA、ACES、PIPES、MOPSO、BES、MOPS、TES、HEPES、TRIS、EPPS、TRICINE、BICINE、TAPS、GLYGLY、CHES、CAPS。
 

　　使用緩沖液注意這些問題
 

　　1) 緩沖液使用前必須過濾。
 

　　2) 溶劑、樣品易受到細(xì)菌和霉菌的影響，要注意清潔。
 

　　3)一般不能直接用有機(jī)溶劑做清洗沖洗。
 

　　4)梯度洗脫時(shí)，選低吸收值的緩沖液 ：
 

　　例如：梯度洗脫時(shí)，緩沖液與有機(jī)相應(yīng)預(yù)混，以防止析鹽。在保證峰不拖尾的情況下，盡可能選用低濃度的緩沖鹽，防止析鹽; 緩沖鹽濃度，一般用20～30mM基本上就可以了，如果流動(dòng)相中有機(jī)相含量高的話，流動(dòng)相中的鹽類緩沖液濃度就不能過高，鹽的濃度起碼要保證在流動(dòng)相條件下不會(huì)析出。離子對緩沖液濃度要高一點(diǎn)，一般50～100mM。