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鐵強(qiáng)化牛血清,養(yǎng)細(xì)胞更出色
點(diǎn)擊次數(shù):964 更新時(shí)間:2020-11-27

鐵對(duì)體外的細(xì)胞培養(yǎng)非常重要(1)(12)。它作為一些酶的輔因子,參與了細(xì)胞的多種生-理功能,其中至少有如下三個(gè)重要方面:

01、參與細(xì)胞的呼吸代謝

線粒體是細(xì)胞氧化代謝的部位和能量中樞,其中,線粒體膜上的琥珀酸脫氫酶扮演著關(guān)鍵角色。鐵即是琥珀酸脫氫酶的一部分,參與細(xì)胞的氧化代謝和能量生成。

02、保護(hù)細(xì)胞不受氧化損傷

鐵作為鐵卟啉結(jié)構(gòu)的核心,是過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶等酶的關(guān)鍵組成部分,能消除過(guò)氧化氫和酚類(lèi)、胺類(lèi)、醛類(lèi)的毒性,使細(xì)胞免于遭受H2O?等過(guò)氧化物帶來(lái)的損傷,為細(xì)胞提供抗氧化防御,使細(xì)胞geng健康。

03、提高細(xì)胞密度和存活率

鐵是細(xì)胞增殖所必需的元素。如果沒(méi)有鐵,細(xì)胞就不能在增殖時(shí)從G1期進(jìn)入到S期(2,3)。缺鐵會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡和死亡(4)。如果缺乏鐵, 細(xì)胞復(fù)制時(shí)DNA合成將受到影響。因?yàn)殍F是RNA聚合酶所必需(11),它也是核糖核苷酸還原酶的組成部分(5)。而核糖核苷酸還原酶是細(xì)胞在合成DNA過(guò)程中,將核糖核苷酸轉(zhuǎn)變成脫氧核糖核苷酸的限速酶(6)。已知有藥廠已開(kāi)發(fā)鐵配方專(zhuān)-利,用于加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中,以提高細(xì)胞密度和存活(10)。

對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,鐵也是一種重要的補(bǔ)充劑。有研究顯示,在無(wú)血清培養(yǎng)基中,鐵能誘導(dǎo)LI 210細(xì)胞生長(zhǎng)。并且它不依賴(lài)轉(zhuǎn)鐵蛋白的存在(7)。

在將鐵強(qiáng)化小牛血清作為胎牛血清(FCS)的替代品方面,從1988年以來(lái),已陸續(xù)有一些相關(guān)報(bào)道,如對(duì)于一些細(xì)胞系,鐵強(qiáng)化小牛血清在促細(xì)胞生長(zhǎng)或克隆率方面,等效或優(yōu)于FCS(13)。對(duì)于牛肌源細(xì)胞,在DMEM/M199培養(yǎng)基中添加鐵強(qiáng)化小牛血清,在細(xì)胞增殖速率方面,優(yōu)于胎牛血清、新生牛血清和馬血清(8)。在CHO細(xì)胞的HGPRT基因突變?cè)囼?yàn)中(該實(shí)驗(yàn)常用于化學(xué)物的遺傳毒性檢測(cè)),在倍增時(shí)間和克隆率方面,補(bǔ)鐵型小牛血清和FCS沒(méi)有顯著差異,補(bǔ)鐵型小牛血清*可以取代FCS,從而降低實(shí)驗(yàn)成本(9)。

值得指出的是,鐵強(qiáng)化牛血清的使用效果與細(xì)胞類(lèi)型和所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基關(guān)系密切。在一項(xiàng)細(xì)胞長(zhǎng)期生長(zhǎng)的比較研究中,發(fā)現(xiàn)鐵強(qiáng)化小牛血清性能不如FCS,但優(yōu)于小牛血清(14)。

因此,使用鐵強(qiáng)化牛血清,可以預(yù)期,其性能必然優(yōu)于普通牛血清。

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