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今日解析:生物試劑的洗刷辦法
點擊次數(shù):668 更新時間:2020-03-13

   洗刷這是試驗操作過程中看似很簡單但又至關重要的一個過程,所以今天結合技術人員的建議和輔導來給你們遍及一下這方面小常識。
生物試劑的洗刷辦法
1. 自動洗板機:每孔參加洗刷液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗刷液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不行觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
生物試劑試驗開端前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量防止起泡。
1.加樣:分別設空白孔、規(guī)范孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加規(guī)范品或待測樣品100μl,留意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,悄悄晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證試驗結果有效性,每次試驗請運用新的規(guī)范品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中參加Detection Ab工作液 100μl(在運用前15分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內液體,甩干,洗板5次,辦法同過程3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(依據(jù)實際顯況酌情縮短或延長,但不行超過30分鐘。當規(guī)范孔出現(xiàn)顯著梯度時,即可停止)。
7.每孔加停止液50μl,停止反響,此時藍色立轉黃色。停止液的參加次序應盡量與底物液的參加次序相同。
8.生物試劑立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前翻開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。
9.試驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期完畢。

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